人神经调节蛋白1(NRG-1)ELISA试剂盒

本试剂盒运用经典双抗体夹心酶联免疫吸附技术，将高特异性人神经调节蛋白1(NRG-1)抗体固定于微孔板孔底，待测样本、标准品中的NRG-1抗原可与固相抗体精准结合，随后加入酶标记特异性抗体，形成稳定的夹心式免疫复合物，彻底洗除未结合的游离蛋白与酶标抗体后，加入TMB底物进行显色，在过氧化物酶作用下产生蓝色显色产物，终止液作用后颜色转为黄色，酶标仪检测吸光度数值，数值高低对应样本中NRG-1的含量水平，通过标准曲线可精准定量样本中靶标含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限 4.2pg/ml

检测范围：25pg/ml ~ 1500pg/ml

反应时间：样本室温孵育 90min，洗板后酶结合物孵育 60min，显色 20min，总耗时 2h50min

保存条件：试剂盒主体 2~8℃，标准品干粉 - 20℃避光保存，复溶后仅限单次使用

显色系统：可溶性 TMB 显色底物，酸性终止液终止变色

检测波长：主 450nm，参考 620nm 双波长测定

标准曲线绘制：四参数拟合曲线，设置 8 个浓度梯度，剔除异常离群孔后拟合方程

注意事项：该指标易受溶血样本干扰，重度溶血血清直接作废；洗板步骤必须彻底防止非特异性结合
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

试剂室温回温 28min，稀释浓缩洗涤缓冲液，精准倍比稀释 NRG-1 标准品制备浓度梯度，拆分酶标板，未用板条密封 2~8℃存放。

标准孔加入 50μL 各梯度 NRG-1 标准溶液；待测孔加入 45μL 样本稀释液 + 15μL 待测生物样本；空白对照孔无任何加液。

所有实验孔添加 HRP 标记抗 NRG-1 抗体工作液 100μL，封板膜密封，37℃恒温孵育 70min。

去除封板，倒掉孔中液体，每孔加满洗涤液静置 35s，弃液拍干，重复洗板 6 轮。

每孔加入显色 A 液 50μL、显色 B 液 50μL，轻微震荡混匀，37℃避光显色 18min。

每孔加注终止液 50μL，轻柔混匀终止催化显色反应。

450nm 波长读取每孔 OD 数值，建立标准曲线，计算样本神经调节蛋白 1 具体浓度。