人上皮膜抗原(EMA)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔预先包被抗人上皮膜抗原特异性抗体。样本中的EMA抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合杂质后，加入HRP标记二抗形成稳定免疫复合物，经显色、终止反应后检测吸光度，结合标准曲线可精准检测样本中上皮膜抗原的含量。
产品参数：

‌灵敏度：检出下限 0.073ng/mL

检测范围：0.23ng/mL～14.72ng/mL

反应时间：样本孵育 56min，二抗孵育 48min，显色 15.8min

保存条件：未开封试剂盒有效期 6 个月，2～8℃防潮储存；开封试剂 28 天内使用完毕

显色系统：单组份稳定 TMB 显色工作液

检测波长：450nm/630nm 双波长

标准曲线绘制：最小二乘法线性回归绘制标准曲线

注意事项：间叶组织来源样本本底值极低，需设置阴性对照孔排除板孔污染
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

全部试剂室温平衡 32min，稀释浓缩洗涤液；拆分酶标板条划分标准、样本、空白孔。

梯度 EMA 标准品 50μL 加入标准孔，稀释待测样本 50μL 加入样本孔，空白孔不加试剂。

各检测孔加入一步法酶结合抗体工作液 100μL，封板膜严实封口。

37℃恒温避光孵育 68min，膜抗原延长孵育时间。

洗板 4 次，每次洗涤液浸泡 35s，甩干废液后吸水纸拍净残液。

每孔加入显色混合底物 100μL，37℃避光显色 16min。

加入终止液终止反应，酶标仪 450nm 检测 OD 值，计算上皮膜抗原含量。