人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA试剂盒

本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA原理，微孔板预包被GPC-3特异性捕获抗体，样本中的人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3与固相抗体特异性结合，加入酶标记检测抗体形成免疫复合物，洗涤后底物发生酶促显色反应，吸光度值与GPC-3浓度正相关，对照标准曲线完成定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：≤0.02ng/mL

检测范围：0.05ng/mL–5ng/mL

反应时间：一抗 75min，二抗 45min，显色 12min，总 132min

保存条件：2–8℃避光保存，底物液开封后尽快用完

显色系统：高灵敏度 TMB 单液显色

检测波长：450/630nm

标准曲线绘制：七梯度标准品四参数 Logistic 拟合曲线

注意事项：肝癌血清样本建议无脂血，高脂血清易造成孔底非特异性吸附
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

样本稀释：血清 / 腹水样本稀释后涡旋混匀，去除絮状沉淀；

板条加样：每孔加入标准品、待测样本 100μL，设置复孔；

一步法孵育：直接添加酶结合工作液，封板 37℃孵育 73min；

洗板除游离物：洗涤液浸泡 34s，拍干，重复洗板 5 次；

底物显色：避光加入显色液 20min；

终止反应：滴加终止液终止显色；

定量检测：酶标仪 450nm 读数，计算 GPC-3 浓度。