人杀菌肽B(CecB)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，酶标板微孔预先包被抗人杀菌肽B特异性抗体。待测样本中的CecB抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离杂质后，加入酶标记二抗孵育结合，形成固相免疫复合物，经显色、终止反应后测定吸光度，依据标准曲线定量检测样本中杀菌肽B的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：检出下限 1.5pg/mL

检测范围：4.2pg/mL～268.8pg/mL

反应时间：室温孵育 74min，37℃二抗 61min，避光显色 22min

保存条件：多肽类标准品分装 - 20℃冻存，试剂盒主体 2～8℃避光

显色系统：一体式预制 TMB 显色工作液

检测波长：450nm 主波长，650nm 参比

标准曲线绘制：竞争法反向四参数 Logistic 拟合曲线

注意事项：抗菌肽易被蛋白酶降解，样本采集后立即添加蛋白酶抑制剂
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

全部试剂室温平衡 30min，稀释浓缩洗涤液；固定酶标板框架标注孔位信息。

梯度 CecB 标准品 50μL 加入标准孔，稀释待测样本 50μL 加入样本孔，空白孔不加试剂。

各检测孔加入一步法酶联抗体工作液 100μL，封板后轻微震荡混匀。

37℃恒温避光孵育 60min，小分子肽类稳定孵育时长。

倾倒孔内废液，洗涤液洗板 4 次，每次浸泡 36s，吸水纸吸干残液。

每孔添加显色混合底物 100μL，37℃避光显色 14min。

加入终止液 50μL，酶标仪 450nm 读数，对照标准曲线定量杀菌肽 B 浓度。