人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA试剂

本试剂盒采用间接法酶联免疫吸附检测原理，将纯化的人乳铁蛋白抗原包被于酶标板微孔。检测过程中，样本中的乳铁蛋白IgG抗体与固相抗原特异性结合，孵育洗涤后加入酶标记抗人IgG二抗，再次洗涤后进行底物显色，终止反应后测定吸光度，吸光度数值与样本中靶抗体含量成正比，通过标准曲线实现定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：检出限 0.045AU/mL

检测范围：0.13AU/mL～8.32AU/mL

反应时间：抗原结合孵育 49min，酶标抗人 IgG 孵育 45min，显色 15min

保存条件：试剂盒 2～8℃避光密封，开封后 30 天内用完剩余试剂

显色系统：临用新配双组份 TMB 显色液

检测波长：仅 450nm 波长读取吸光度

标准曲线绘制：浓度取对数后线性回归绘制定量曲线

注意事项：乳汁样本需离心去除脂肪层，脂类包裹抗原会降低抗体结合效率
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

试剂盒组分室温平衡 32min，配比稀释洗涤液；固定酶标板框架区分孔位类型。

标准品孔加入梯度稀释 LF 抗体 IgG 标准品 50μL，样本孔加入稀释待测样本 50μL，空白孔空置。

非空白孔加入一步法酶标二抗工作液 100μL，密封封板膜。

37℃避光孵育 66min，避光孵育避免底物提前氧化。

洗板 4 次，每次洗涤液浸泡 36s，甩干废液后吸水纸拍净残液。

每孔添加显色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 16min。

加入终止液终止反应，酶标仪 450nm 读数，计算乳铁蛋白 IgG 抗体滴度。