人妊娠疱疹抗体(HG)ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接法酶联免疫吸附检测原理，将纯化的妊娠疱疹抗原包被于酶标板微孔表面。检测时，样本中的人妊娠疱疹抗体可与固相抗原特异性结合，洗涤后加入酶标记抗人抗体，孵育反应并洗涤后进行底物显色，终止反应后测定吸光度，吸光度数值与样本中HG抗体含量成正比，通过标准曲线可定量检测抗体浓度。
产品参数：

‌灵敏度：检出下限 0.05AU/mL

检测范围：0.15AU/mL～9.6AU/mL

反应时间：一抗孵育 44min，二抗温育 41min，显色 12.5min

保存条件：试剂盒 2～8℃防潮避光，微孔板条单独密封，防止抗体失活

显色系统：HRP 催化单组份 TMB 显色

检测波长：仅 450nm 波长测定

标准曲线绘制：对数浓度线性回归绘图计算抗体滴度

注意事项：孕期血清样本避免高温处理，高温会导致免疫抗体变性失效
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂盒液体试剂室温放置 30min，配比配制洗涤工作液；固定酶标板框架区分孔位。

梯度 HG 抗体标准品 50μL 加入标准品孔，待测稀释血清 50μL 加入样本孔，空白孔留空。

各检测孔加入一步法酶标记二抗工作液 100μL，封板封口。

37℃避光孵育 60min，全程避光操作。

弃液后洗涤液加满每孔浸泡 30s，重复洗板 5 次，倒置拍干水分。

每孔加入显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光显色 14min。

加入终止液 50μL 终止显色，450nm 波长读数，对照标准曲线测定 HG 抗体水平。