人酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附技术，微孔板固定抗人酪氨酸羟化酶（TH）特异性抗体，待测样本中的TH抗原与固相抗体特异性结合，洗涤后加入辣根过氧化物酶标记检测抗体，形成夹心复合物，底物显色后通过吸光度检测，定量测定样本中TH蛋白的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：检出下限 0.3 pg/mL

检测范围：0.2 pg/mL ~ 12.8 pg/mL

反应时间：孵育 79min，酶标物 43min，显色 17min

保存条件：2~8℃冷藏，不可冻存微孔板及显色液

显色系统：TMB 显色底物体系

检测波长：450nm/630nm 双波长校正

标准曲线绘制：X 轴标准品浓度，Y 轴 OD 值，四参数方程构建标准曲线

注意事项：神经组织样本低温处理，常温放置易导致蛋白失活
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 30min，取出酶标板，排布全部实验孔位。

每孔加入梯度标准品或稀释待测样本 50μL，紧接着加入酶工作液 50μL，封板膜密封。

水平晃动酶标板混匀，37℃恒温孵育 60min。

撕膜倒液，洗涤液注满微孔浸泡 30s，彻底拍干，洗板 5 轮。

显色液 A、B 各 50μL，避光显色 15min。

终止液 50μL 快速加入终止显色。

酶标仪 450nm 读数，拟合曲线定量 TH 蛋白浓度。