人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附原理，微孔板固定抗人可溶性转铁蛋白受体（sTfR）特异性抗体，待测样本中的sTfR抗原与固相抗体结合，洗涤去除游离杂质后加入酶标记检测抗体，形成特异性夹心复合物，底物显色后测定吸光度，结合标准曲线定量检测sTfR浓度。
产品参数：

‌灵敏度：检出限 0.4 mg/L

检测范围：0.25 mg/L ~ 16 mg/L

反应时间：温育 88min，二抗 50min，显色 20min

保存条件：2~8℃避光，浓缩洗涤液结晶温水化开后使用

显色系统：TMB 显色底物体系

检测波长：450nm，参考 620nm

标准曲线绘制：梯度标准品上机检测，软件生成标准曲线定量

注意事项：严重贫血样本建议做梯度稀释防止结果超出检测上限
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 35min，取出酶标板，设置空白梯度标准孔与待测样本孔。

空白孔不加样，其余孔加样 50μL，即刻加入酶结合液 50μL，封板密闭。

振荡混匀体系，37℃孵育 68min。

弃废液，洗涤液浸泡 38s，彻底拍干，洗板 6 次。

显色底物 A、B 各 50μL，避光显色 19min。

加入终止液 50μL 终止显色。

酶标仪 450nm 测值，计算 sTfR 蛋白浓度。