人可溶性腺苷酸环化酶(sAC)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，预先将抗人可溶性腺苷酸环化酶（sAC）抗体包被于微孔板固相载体，待测样本中的sAC抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入酶标记检测抗体，构建特异性免疫夹心复合物，底物显色终止后检测吸光度，定量测定样本中sAC的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低可测 0.45 U/mL

检测范围：0.312 U/mL ~ 20 U/mL

反应时间：温育 84min，酶标抗体 46min，显色 18min

保存条件：2~8℃避光，底物液不可与金属器皿接触

显色系统：单组分 TMB 显色，稀硫酸终止

检测波长：450nm

标准曲线绘制：依据标准品梯度 OD 值拟合标准曲线计算待测样本含量

注意事项：样本采集后 4℃可存放 2 天，超时需冻存
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂室温放置 27min，截取实验用微孔条并做好标记。

标准孔与样本孔加入液体 50μL，同步加入酶标记液 50μL，封板密闭。

轻摇混匀后 37℃孵育 56min。

弃去孔内液体，洗液浸泡 27s，拍干，循环洗板 5 次。

显色底物 A、B 各 50μL，避光显色 13min。

滴入终止液 50μL 终止反应。

450nm 读取吸光度，定量 sAC 浓度。