人纽蛋白(VCL)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔固定VCL特异性单克隆抗体，待测样本中的纽蛋白与固相抗体特异性结合，加入酶标记配对抗体形成夹心免疫结构，洗涤去除游离杂质后催化底物显色，终止后检测吸光度，结合标准曲线定量测定样本中VCL的含量。
产品参数：

‌灵敏度：0.68 pg/mL

检测范围：3pg/mL～102pg/mL

反应时间：封闭 31min，样本 83min，酶结合物 41min，显色 16min，总 171min

保存条件：2～8℃避光，洗涤浓缩液室温存放

显色系统：A/B 底物混合显色，稀硫酸终止

检测波长：450nm+600nm 双波长校正

标准曲线绘制：8 点梯度浓度，非线性拟合标准曲线

注意事项：贴壁细胞裂解前弃去培养基，避免培养基蛋白干扰
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

样本前处理：细胞裂解液高速离心去除残渣，稀释待测样本；梯度稀释 VCL 标准品溶液。

板孔点样：各微孔依次加入标准品、待测样本、空白对照液 100μL。

酶标抗体共加：每孔加入酶标记抗 VCL 抗体 100μL，封板密封。

孵育反应：37℃避光孵育 64min。

洗板除杂：弃净孔内液体，洗液浸泡 40s 拍干，洗板 5 次。

避光显色：加入显色混合底物，室温显色 14min。

终止检测：终止液终止反应，450nm 测定吸光度，计算 VCL 蛋白表达量。