人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA试剂盒

本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板包被UPP1特异性抗体，待测样本中的尿嘧啶核苷磷酸化酶1抗原与固相抗体特异性结合，加入酶标记配对抗体形成夹心免疫结构，充分洗涤后进行底物显色反应，显色深浅与样本中UPP1含量成正比，通过酶标仪读数完成定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：0.49 ng/L

检测范围：5.5ng/L～295ng/L

反应时间：封闭 30min，样本 80min，二抗 44min，显色 17min，总 171min

保存条件：未开封试剂盒 2-8℃，开封后 1 个月内用完

显色系统：A/B 底物液混合显色

检测波长：450nm+600nm 双波长校正

标准曲线绘制：7 个浓度梯度，线性回归绘制曲线

注意事项：核酸类样本操作避免外源酶污染
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

预处理：稀释浓缩洗涤液，梯度稀释 UPP1 标准品，待测上清样本混匀离心。

板孔加样：各微孔加入标准品、待测样本、空白对照 100μL，无气泡加样。

一步法酶抗加入：每孔加入 HRP 标记 UPP1 抗体 100μL，密封封板膜。

恒温结合孵育：37℃避光孵育 58min。

洗板操作：倒掉废液，洗液浸泡 35s 拍干，循环洗板 5 次。

TMB 显色：加入显色底物，室温暗处显色 18min。

终止检测：加终止液终止反应，450nm 测定 OD 值，标准曲线计算 UPP1 浓度。