人鸟氨酸脱羧酶(ODC)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理，酶标板预先包被ODC特异性捕获抗体，样本中的鸟氨酸脱羧酶抗原与固相抗体特异性结合，随后加入酶标记检测抗体形成免疫复合物，充分洗涤后进行底物显色反应，终止后检测OD值，依据标准曲线精准计算样本中ODC的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：0.45 ng/mL

检测范围：3ng/mL～190ng/mL

反应时间：室温孵育 102min，酶结合物 42min，显色 13min，总 157min

保存条件：试剂盒 2-8℃避光密封，底物液单独避光储存

显色系统：TMB 双组份显色液

检测波长：450nm

标准曲线绘制：7 梯度标准品，非线性回归拟合曲线

注意事项：样本不可经高温煮沸处理，靶蛋白会完全变性无法结合
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

预处理：试剂盒室温平衡 30min，稀释洗涤液，梯度配制 ODC 系列标准稀释液，细胞上清离心取液。

微孔加样：标准孔、样本孔、阴性对照孔各加入液体 100μL。

酶标抗体共加：每孔加入 HRP 标记 ODC 抗体 100μL，封板震荡混匀。

孵育反应：37℃避光孵育 64min。

洗板除杂：弃净孔内液体，洗液浸泡 40s 拍干，洗板 5 次。

避光显色：加入显色底物，室温显色 13min。

终止定量：终止液终止显色，酶标仪 450nm 读数，换算样本 ODC 含量。