人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测技术，酶标板预包被MAdCAM-1特异性单克隆抗体，待测样本中的黏膜地址素细胞黏附分子与固相抗体特异性结合，加入酶标记检测抗体形成稳定夹心复合物，洗涤去除非特异性结合杂质后进行酶促显色，显色强度对应靶蛋白浓度，通过标准曲线换算完成定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：0.58 ng/L

检测范围：5ng/L～330ng/L

反应时间：封闭 32min，样本 86min，二抗 47min，显色 15min，总 180min

保存条件：未开封 2-8℃，开封后 2 个月内用完试剂盒

显色系统：A/B 底物混合后显色

检测波长：450nm 单波长读数

标准曲线绘制：6 点梯度，线性回归绘制标准曲线

注意事项：细胞培养上清需去除悬浮细胞沉淀再上样
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

准备工作：试剂盒组分室温回温，稀释浓缩洗涤液，梯度稀释 MAdCAM-1 标准品。

微孔加样：标准孔、样本孔、空白孔分别加样 100μL，标记孔位信息。

一步共孵加酶抗：每孔加入酶标特异性抗体 100μL，封板轻摇酶标板。

恒温孵育：37℃避光孵育 59min。

洗板去污：倒掉废液，洗液浸泡 25s 拍干，洗板 4 次。

避光显色：加入显色 A、B 液各 50μL，显色 16min。

终止定量：终止液终止反应，450nm 测定 OD 值，定量 MAdCAM-1 表达量。