人抗载脂蛋白抗体A1(Apo A1)ELISA试剂盒

本试剂盒基于间接ELISA原理，微孔板固定纯化的人载脂蛋白A1（Apo A1）抗原，待测样本中的抗Apo A1抗体可与固相抗原发生特异性结合，洗涤去除游离成分后，加入辣根过氧化物酶标记二抗孵育，底物显色终止后检测吸光度，结合标准曲线即可定量测定样本中抗载脂蛋白A1抗体的含量。
产品参数：

‌灵敏度：检出限≤0.4 ng/mL

检测范围：0.125 ng/mL ~ 8 ng/mL

反应时间：室温孵育 70min，酶标抗体 45min，显色 16min

保存条件：2~8℃冷藏，底物液避光单独存放，不可强光照射

显色系统：单组分 TMB 显色体系

检测波长：450nm

标准曲线绘制：标准品梯度稀释上机检测，软件自动生成标准曲线换算样本浓度

注意事项：血脂严重浑浊样本需稀释后重新检测
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂室温复温 24min，按需截取微孔板，标记各组实验孔。

加样孔加入标准品或待测稀释样本 50μL，同步添加酶试剂 50μL，封板封口。

板面混匀后 37℃孵育 56min。

弃废液，洗涤液浸泡 26s，拍干，洗板 4 次。

显色 A、B 液各 50μL，避光显色 13min。

终止液 50μL 每孔添加，混匀终止。

450nm 读取吸光值，换算 Apo A1 抗体浓度。