人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术，微孔板固相包被人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)特异性抗体，检测过程中，样本与标准品中的pRB抗原与固相抗体精准结合，孵育洗涤后加入酶标记配对抗体，形成稳定免疫复合物，经酶促显色、终止反应后，通过酶标仪检测吸光度，数值高低对应样本中pRB的表达浓度，结合标准曲线完成定量分析。
基本参数‌：

产品名称：人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA试剂盒

英文名称：pRB   Elisa Kit
货号：Y-E280

规格：48T/96T

灵敏度：最小检出 0.35ng/mL

检测范围：2.2ng/mL ~ 800ng/mL

反应时间：样本孵育 74min，二抗温育 52min，避光显色 19min，总时长 2h25min

保存条件：整套试剂 2～8℃冷藏，洗涤液室温储存，终止液不可低温存放避免结晶

显色系统：单组分 TMB 显色底物，1M 硫酸终止

检测波长：仅 450nm 检测 OD 值

标准曲线绘制：线性回归法构建标准曲线，6 个浓度梯度点

注意事项：肿瘤组织样本匀浆后务必离心去除大块组织残渣；操作台面避免强光直射试剂盒
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：

试剂盒组分室温平衡 23min，稀释洗涤缓冲液，逐级稀释 pRB 标准品，取用实验板条。

标准孔加 50μL 梯度 pRB 标准溶液；样本孔加 50μL 稀释液 + 10μL 样本；空白孔不加液体。

检测孔加入 HRP 标记抗 pRB 抗体 100μL，封板 37℃孵育 53min。

弃液后洗涤液加满每孔静置 30s，甩干洗板 4 次，拍干微孔板。

显色 A、B 液各 50μL，混匀避光显色 13min。

加入终止液 50μL 混匀终止显色。

450nm 测吸光度，标准曲线计算 pRB 含量。
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