人生长相关蛋白43(GAP-43)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术原理，96孔微孔板固相包被人生长相关蛋白43(GAP-43)特异性抗体，检测时加入待测样本与标准品，样本中的GAP-43抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合组分后加入酶标记二抗，形成夹心免疫复合物，经TMB底物显色、终止反应后，检测特定波长吸光度，吸光度值与样本中GAP-43蛋白含量成正比，依托标准曲线完成定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人生长相关蛋白43(GAP-43)ELISA试剂盒

英文名称：GAP-43 ELISA Kit
货号：Y-E3503

规格：48T/96T

灵敏度：最小检出 0.47ng/mL

检测范围：2.8ng/mL ~ 950ng/mL

反应时间：37℃温育 92min，酶标记二抗 60min，避光显色 25min，总时长 3h17min

保存条件：试剂盒主体 2~8℃，终止液常温密闭存放，板条开封后必须密封防潮

显色系统：单组分 TMB 底物显色，1N 硫酸终止反应

检测波长：仅 450nm 读取吸光度数值

标准曲线绘制：最小二乘法线性拟合，8 个标准品梯度点

注意事项：脑组织匀浆样本需充分离心去除组织沉淀；全程防止底物接触金属器具导致提前变色
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

试剂盒所有试剂室温静置 21min，稀释浓缩洗涤液，梯度稀释 GAP-43 标准品，划分酶标板孔。

标准孔加入 50μL 梯度标准液；样本孔加 50μL 稀释液 + 10μL 待测样本；空白孔不加液体。

除空白孔外每孔加入酶标记抗体工作液 100μL，封板 37℃孵育 59min。

弃去孔内液体，洗涤液加满每孔静置 30s，甩干循环 5 次，板条拍干。

显色 A、B 液各 50μL 每孔添加，混匀避光显色 12min。

加入终止液 50μL 混匀终止反应。

酶标仪 450nm 读数，绘制标准曲线计算 GAP-43 含量。
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