人生长激素释放因子(GH-RF)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术，将人生长激素释放因子(GH-RF)特异性抗体固定于微孔板固相载体，加入样本和标准品后，GH-RF抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合物质，再加入酶标记二抗形成夹心复合物，经底物显色、终止反应后，通过酶标仪测定吸光度，吸光度数值与样本中GH-RF含量呈正相关，可精准计算样本中靶标蛋白浓度。
基本参数‌：

产品名称：人生长激素释放因子(GH-RF)ELISA试剂盒

英文名称：GH-RF  Elisa Kit
货号：Y-E036

规格：48T/96T

灵敏度：最小检出 3.4pg/mL

检测范围：20pg/mL ~ 900pg/mL

反应时间：室温结合孵育 85min，酶标二抗 58min，避光显色 16min，总时长 2h39min

保存条件：整套试剂 2～8℃避光，终止液常温密封存放无特殊避光要求

显色系统：单组分 TMB 显色体系，强酸终止反应

检测波长：450nm 与 650nm 双波长校正读数

标准曲线绘制：线性回归法绘制标准曲线，7 个稀释浓度点

注意事项：样本采集后迅速冰浴处理，GH-RF 极易降解；洗板时防止孔内液体残留
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒全部试剂室温回温 27min，稀释洗涤液，倍比稀释 GH-RF 标准品，规划酶标板孔位。

标准孔添加 50μL 各浓度标准液；样本孔加 50μL 稀释缓冲液 + 10μL 样本；空白孔空置。

非空白孔加入酶结合抗体 100μL，封板膜密封，37℃孵育 60min。

撕膜弃液，洗涤液加满每孔静置 32s，甩干，洗板 5 次，拍干微孔板。

显色 A、B 液每孔各 50μL，混匀后避光显色 16min。

加入 50μL 终止液混匀终止显色。

450nm 测定 OD 值，标准曲线计算 GH-RF 含量。
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