人脑啡肽(ENK)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔预先固定ENK特异性捕获抗体，待测样本中的脑啡肽抗原与固相抗体特异性结合，加入酶标记检测抗体形成夹心免疫复合物，洗涤去除游离组分后，酶催化底物产生有色产物，显色深浅与样本中ENK浓度正相关，通过吸光度检测和标准曲线拟合实现精准定量。
产品参数：

‌灵敏度：＜0.08 pg/mL

检测范围：0.2pg/mL～40pg/mL

反应时间：37℃孵育 140min，二抗 70min，显色 14min，总 224min

保存条件：试剂盒 2～8℃，多肽标准品 - 20℃分装冻存

显色系统：TMB 双组份显色体系

检测波长：450nm/650nm 双波长

标准曲线绘制：8 个低浓度梯度，四参数拟合标准曲线

注意事项：脑组织样本需冰上匀浆提取，防止肽类降解失活
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂调配：稀释洗涤液，梯度稀释 ENK 标准品，脑脊液样本低速离心取上清稀释备用。

板孔加样：各微孔加入标准品、待测样本、空白试剂 100μL。

一步法酶抗添加：每孔加入酶标记抗 ENK 抗体 100μL，封板密封。

恒温避光孵育：37℃孵育 53min。

洗板除杂：倒掉废液，洗液浸泡 35s 拍干，重复洗板 5 次。

显色反应：加入显色混合液，避光显色 17min。

终止检测：终止液终止酶促反应，450nm 测吸光度，计算 ENK 含量。