人抗胰岛素受体抗体(AIRA)ELISA试剂盒

本试剂盒采用酶联免疫间接检测原理，微孔板预先包被纯化的人胰岛素受体抗原，待测样本中的抗胰岛素受体抗体（AIRA）与固相抗原特异性免疫结合，经洗涤去除未结合杂质后，加入辣根过氧化物酶标记二抗孵育结合，底物显色并终止反应后，通过酶标仪检测吸光度，对照标准曲线即可定量测定样本中AIRA的浓度。
基本参数‌：

产品名称：人抗胰岛素受体抗体(AIRA)ELISA试剂盒

英文名称：AIRA   Elisa Kit
货号：Y-E414

规格：48T/96T

灵敏度：检出限＜0.9 mU/L

检测范围：0.625 mU/L ~ 40 mU/L

反应时间：室温孵育 90min，酶标抗体 50min，显色 22min

保存条件：试剂盒全程 2~8℃避光存放，浓缩试剂使用前充分摇匀

显色系统：双组份 TMB 显色液，终止液终止变色

检测波长：450nm

标准曲线绘制：手动录入标准品浓度与吸光度，软件拟合标准曲线换算结果

注意事项：高脂、黄疸样本干扰检测结果，建议预处理后检测
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂室温复温 22min，按需拆分酶标板条，标记标准孔、样本孔、对照孔。

各加样孔加入标准品或稀释待测样本 50μL，随即加入酶标记工作液 50μL，封板膜密封。

混匀板面液体，37℃孵育 62min。

弃去孔内液体，加满洗涤液浸泡 32s，拍干，洗板 6 次。

加入显色 A、B 液各 50μL，避光 37℃显色 13min。

每孔添加终止液 50μL，混匀终止反应。

450nm 读取吸光度，曲线拟合计算 AIRA 抗体浓度。
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