人抗网硬蛋白抗体(ARA)ELISA试剂盒

本试剂盒基于ELISA间接检测原理，将高纯度人网硬蛋白抗原固定于微孔板表面，待测样本中的抗网硬蛋白抗体（ARA）能够与固相抗原发生特异性免疫结合，洗板去除游离组分后，加入辣根过氧化物酶标记的抗人免疫球蛋白二抗进行孵育结合，经底物显色、终止反应后，通过检测孔内吸光度变化，依据标准曲线即可定量检测样本中ARA的含量。
基本参数‌：

产品名称：人抗网硬蛋白抗体(ARA)ELISA试剂盒

英文名称：AGPA/PCA   Elisa Kit
货号：Y-E416

规格：48T/96T

灵敏度：最低检出限＜0.8 U/mL

检测范围：1.25 U/mL ~ 80 U/mL

反应时间：一抗孵育 90min，二抗孵育 45min，避光显色 20min

保存条件：试剂盒整体 2~8℃冷藏，严禁冷冻；微孔板干燥剂密封存放

显色系统：双组份 TMB 显色体系，2M H₂SO₄终止

检测波长：450nm 单波长检测

标准曲线绘制：标准品梯度稀释，OD 值对应浓度采用 Logistic 四参数回归拟合标准曲线

注意事项：血清样本需离心去除溶血、脂血杂质；底物液不可暴露强光
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

所有试剂提前室温放置 25min，拆分所需条板，剩余板条密封冷藏保存，排布标准品孔、待测样本孔、质控孔。

标准品孔梯度加入不同浓度标准品 50μL，样本孔加入稀释后待测血清样本 50μL，直接向所有加样孔添加酶标记抗体工作液 50μL，覆膜封板。

台面水平晃动酶标板 1min 混匀，置于 37℃温箱避光孵育 55min。

揭开封膜，倾倒弃液，每孔注满洗涤液静置 25s，倒扣在吸水纸上彻底拍干，循环洗板 4 次。

按顺序每孔添加显色液 A、B 各 50μL，避光环境下 37℃孵育显色 12min。

每孔加入终止液 50μL，轻晃板面使反应完全终止。

酶标仪单波长 450nm 读取吸光数值，拟合标准曲线换算 ARA 抗体浓度。
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