人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)ELISA试剂盒

本试剂盒基于间接酶联免疫吸附检测原理，微孔板固相包被纯化的突变型瓜氨酸波形蛋白（MCV）抗原，待测样本中的抗MCV抗体可与固相MCV抗原特异性结合，孵育反应后洗去未结合杂蛋白；加入辣根过氧化物酶标记的抗人二抗，与固相上的目标抗体结合形成免疫复合物，再次洗板去除游离酶标抗体；加入底物显色液进行酶促反应，显色强度与样本中MCV抗体含量正相关，终止反应后检测吸光度，对照标准曲线实现精准定量。
基本参数‌：

产品名称：人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)ELISA试剂盒

英文名称：MCV  Elisa Kit
货号：Y-E418

规格：48T/96T

灵敏度：0.24U/mL

检测范围：0.48U/mL - 15.36U/mL

反应时间：样本孵育 63min，酶标二抗 35min，显色 16min

保存条件：2~8℃冷藏避光，试剂盒有效期 6 个月，开封后 3 个月内用完

显色系统：HRP 介导 TMB 显色

检测波长：450nm，参比 630nm

标准曲线绘制：6 个浓度梯度四参数拟合，类风湿关节炎早期诊断定量参考

注意事项：优于类风湿因子特异性，骨关节炎一般不会出现该抗体阳性
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒全部组分室温回温 39min，取出包被酶标板，划分孔位并做好标记，未使用板条密封避光冷藏。

待测稀释样本加入样本孔 56μL，阴性、阳性对照孔加入对应对照品 56μL，空白孔空置不加试剂。

直接向全部检测孔滴加酶结合标记液 56μL，封板膜严实密封，低速震荡混匀反应体系。

37℃恒温孵育 78min，酶标板全程水平放置，不得倾斜倒置。

撕掉封板膜，倾倒废液，洗涤液加满每孔浸泡 43s 后甩干，循环洗板 5 次，彻底清除未结合游离蛋白。

每孔加入显色底物液 100μL，避光 37℃显色 7min，精准把控显色时长避免过曝。

滴加终止液 50μL 终止反应，混匀后 450nm 波长读取 OD 值，绘制标准曲线完成 MCV 抗体定量检测。
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