人角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒

本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA原理，微孔板包被人角化细胞生长因子特异性捕获抗体，加入待测样本后，样本中的KGF抗原与固相抗体特异性结合；洗涤去除未结合物质后，加入辣根过氧化物酶标记的KGF检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物；后续经显色、终止、吸光度检测，吸光度值与样本中角化细胞生长因子含量正相关，对照标准曲线可定量检测靶标因子浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最小检出 0.2ng/L

检测范围：0.4~25.6ng/L

反应时间：样本孵育 110min，酶抗体 65min，避光显色 22min

保存条件：试剂盒 2~8℃避光，禁止横置存放微孔板

显色系统：A 液底物 + B 液增强剂组合显色

检测波长：450nm，580nm 参比校正

标准曲线绘制：四参数 Logistic 拟合标准曲线，空白孔调零后定量计算

注意事项：细胞培养上清需去除细胞碎片；洗板彻底防止非特异吸附；实验耗材一次性使用
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 30min，取出酶标板，设置标准品孔、待测样本孔、空白孔，每孔加稀释后样品 100μL，空白孔加稀释液。

直接加入酶标记抗体工作液 50μL，混匀封板。

37℃孵育 60min，单层放置酶标板防止受热不均。

揭膜弃液，洗板液加满每孔静置 30s，甩干，洗板 5 次后彻底扣干。

每孔加显色 A、B 液各 50μL，避光显色 15min。

加入终止液 50μL 混匀终止反应。

450nm 读值，依托标准曲线定量 KGF 浓度。