人胶原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA原理开展检测，微孔板预先包被人Ⅱ型胶原蛋白特异性捕获抗体，加入待测样本后，样本中的HCBⅡ可与固相抗体特异性结合；充分孵育并洗涤干净游离成分后，加入酶标记的Ⅱ型胶原蛋白检测抗体，形成夹心免疫复合物；通过底物酶促显色反应产生有色物质，吸光度值与样本中Ⅱ型胶原蛋白含量呈正相关，对照标准曲线可定量检测样本中靶蛋白的含量。
产品参数：

‌灵敏度：检出下限 1.1ng/mL

检测范围：2.2~140ng/mL

反应时间：一抗孵育 70min，酶二抗 40min，显色 15min

保存条件：2~8℃避光储存，冻干标准品 - 20℃长期保存

显色系统：单组分即用型 TMB 显色液

检测波长：450nm 主波长读数

标准曲线绘制：直线线性拟合标准曲线，标品浓度与 OD 值呈正比关系计算

注意事项：关节液样本需过滤去除絮状杂质；不可剧烈震荡微孔板；终止液具有腐蚀性谨慎操作
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 30min，取出固相酶标板，设置标准品、待测样本、空白三类孔位，每孔加入预处理样品 100μL，空白孔添加稀释液。

直接加入酶结合物工作液 50μL，轻晃混匀后封板。

37℃孵育 65min，酶标板平放于孵育箱内。

揭膜倒掉废液，每孔加满洗涤液静置 30s，甩干，洗板 5 轮后吸干残液。

每孔依次加显色 A、B 液各 50μL，避光显色 16min。

每孔加入终止液 50μL 混匀终止显色。

酶标仪 450nm 读值，根据标准曲线计算 Ⅱ 型胶原蛋白含量。