人降解加速因子(DAF)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，微孔板固相固定人降解加速因子特异性捕获抗体，待测样本中的DAF抗原与固相抗体特异性结合；经孵育、洗涤去除非特异性结合物后，加入辣根过氧化物酶标记的DAF检测抗体，形成稳定的免疫复合物；随后进行底物显色、终止反应，检测各孔吸光度，吸光度数值随样本中DAF含量升高而增大，依据标准曲线即可定量测定样本中人降解加速因子的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低可测 4.5pg/mL

检测范围：9~576pg/mL

反应时间：加样孵育 95min，酶标记抗体 55min，避光显色 13min

保存条件：试剂盒 2~8℃密封保存，开封后各组分 1 个月内使用完毕

显色系统：A、B 双试剂混合后显色

检测波长：450nm，620nm 做空白参比

标准曲线绘制：二次多项式拟合标曲，梯度稀释标准品测定后生成计算公式

注意事项：样本避免高温放置；洗板步骤每孔洗涤不少于 5 次；底物液出现蓝色即失效禁止使用
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

整套试剂室温放置 33min，取用酶标板，划分标准孔、样本孔、空白孔，每孔上样稀释样本 100μL，空白孔加稀释缓冲液。

直接向各孔加入酶偶联抗体液 55μL，摇匀后封板膜密封。

37℃恒温孵育 70min，全程避光操作。

撕膜弃液，洗板液浸润每孔 30s 后拍干，重复洗板 5 次。

每孔加显色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 18min。

加入终止液 50μL 混匀，强制终止反应。

450nm 波长测定 OD 值，空白调零，换算样本 DAF 浓度。