人假定蛋白LOC677340 ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测技术，将高特异性的人假定蛋白LOC677340抗体包被于微孔板载体，加入待测样本后，样本内的LOC677340蛋白与固相捕获抗体特异性结合；洗涤去除非特异性结合物质后，加入酶标记配对检测抗体，形成特异性免疫夹心复合物；经底物显色、终止反应后，利用酶标仪测定吸光度，吸光度值高低与样本中LOC677340蛋白含量呈正相关，以此结合标准曲线实现精准定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：检出下限 0.15ng/mL

检测范围：0.31~20ng/mL

反应时间：样本孵育 55min，酶标记物 30min，显色终止 10min

保存条件：未开启试剂盒 2~8℃；标准品溶解后 - 20℃分装冻存，避免反复冻融

显色系统：双组分 TMB 显色套装

检测波长：450nm，参比 595nm

标准曲线绘制：四参数非线性拟合标准曲线，空白孔调零后录入数值计算

注意事项：全程使用无酶枪头；微孔板不可干板孵育；剩余试剂不可倒回原瓶
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂盒常温放置 29min，分装酶标板，设定标准孔、待测孔、空白孔，每孔上样稀释待测样本 100μL，空白孔填充稀释缓冲液。

直接向各孔加入酶二抗工作液 50μL，轻柔震荡混匀，封板膜封闭。

37℃恒温孵育 68min，孵育过程保持环境避光。

揭膜倒掉孔内液体，洗板液加满每孔静置 30s，拍干，重复洗板 6 次。

依次添加显色 A 液、B 液各 50μL，避光 37℃显色 15min。

每孔加入终止液 50μL，轻晃酶标板混匀终止反应。

450nm 酶标仪测 OD 值，以空白孔调零，依据标准曲线计算 LOC677340 蛋白浓度。