人假定蛋白LOC433328 ELISA试剂盒

本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA原理，以纯化的人假定蛋白LOC433328特异性抗体作为包被抗体固定于微孔板，加入待测样本后，样本中的LOC433328蛋白与固相抗体特异性结合；孵育洗涤后加入对应的酶标记检测抗体，形成稳定的夹心式免疫复合物，去除未结合反应物后加入显色底物，通过酶促反应生成有色产物，产物吸光度与样本中LOC433328蛋白含量正相关，对照标准曲线可定量检测样本中该假定蛋白的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：检出限 1.8ng/L

检测范围：3.75~120ng/L

反应时间：样本孵育 65min，酶标试剂 35min，显色 16min

保存条件：2~8℃密封避光储存，微孔板条独立分装，未用板条放回铝箔袋密封

显色系统：单组份稳定型 TMB 显色液

检测波长：450nm，630nm 校正背景

标准曲线绘制：梯度标准品稀释后测 OD，四参数拟合生成标准曲线方程换算浓度

注意事项：组织匀浆样本需充分离心取上清；所有试剂使用前混匀；严禁不同批次试剂盒混用
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

整套试剂盒室温平衡 35min，取用所需酶标板条，设置标准品孔、待测样本孔、空白孔，每孔加入稀释样本 100μL，空白孔补加稀释液。

直接向全部孔位加入酶偶联试剂工作液 50μL，混匀后封板膜密封酶标板。

37℃孵育 75min，酶标板平铺于孵育箱隔板，保证受热均匀。

撕除封板膜，倾倒废液，洗板液加满每孔静置 30s，拍干，重复洗板 5 次。

每孔加入显色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 20min。

每孔添加终止液 50μL，摇晃混匀终止显色。

450nm 波长检测 OD 值，绘制标准曲线，定量 LOC433328 蛋白浓度。