人甲酰甲硫氨酸(fMet)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，利用纯化的人甲酰甲硫氨酸特异性单克隆抗体包被微孔板，制备固相抗体，向微孔中加入待测样本，样本中的fMet抗原可与固相抗体特异性结合；孵育洗涤后，加入辣根过氧化物酶标记的fMet检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的免疫复合物，彻底洗涤未结合酶标抗体后，加入底物液显色，在酶的催化下产生有色产物，产物吸光度值与样本中人甲酰甲硫氨酸含量呈正相关，依据标准曲线即可定量检测样本中靶标含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检出浓度 2.3pg/mL

检测范围：5~320pg/mL

反应时间：样本结合孵育 70min，酶标记物孵育 40min，显色 12min

保存条件：整套试剂 2~8℃冷藏，洗涤浓缩液可室温长期存放

显色系统：可溶性单组分 TMB 显色液

检测波长：450nm 单一波长测定

标准曲线绘制：四参数拟合，设置空白孔归零后依据梯度标品 OD 值建立曲线

注意事项：尿液样本需离心去除杂质；不可交叉使用枪头避免交叉污染；显色超时务必及时终止
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂盒常温平衡 32min，选取酶标板条，排布标准品孔、待测样本孔、空白孔，每孔加入稀释处理后样品 100μL，空白孔补稀释液。

直接向各孔添加酶标记二抗工作液 55μL，手动缓慢摇匀酶标板，封板膜封口防止液体挥发。

37℃恒温培养箱孵育 70min，酶标板单层平放，不可多层叠加堆放。

撕掉封板膜，弃净孔内液体，每孔加满洗板液静置 30s 后拍干，重复洗板 6 次，吸水纸按压吸干剩余液体。

每孔加入显色底物 A 50μL、底物 B 50μL，避光 37℃显色 16min。

每孔加入终止液 50μL，充分混匀孔内液体，终止显色反应。

酶标仪 450nm 波长检测 OD 值，对照标准曲线计算样本 fMet 具体浓度。