人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附原理，微孔板固相包被MMP-2特异性捕获抗体，加入待测样本与标准品，样本中的MMP-2抗原与固相抗体特异性结合，随后加入酶标记检测抗体形成夹心免疫复合物，充分洗涤去除未结合物质后，加入底物进行酶促显色，有色产物的吸光度值与样本中MMP-2浓度正相关，通过标准曲线计算可定量检测其含量。
产品参数：

‌灵敏度：0.05ng/mL

检测范围：0.15ng/mL~4.8ng/mL

反应时间：37℃孵育 62min；酶结合物 28min；避光显色 15min

保存条件：2~8℃冷藏；剩余板条干燥剂一同密封入袋冷藏

显色系统：TMB 单组份显色液

检测波长：450nm，参比 630nm

标准曲线绘制：7 梯度标准品，非线性拟合标准曲线，样本超量程需稀释重测

注意事项：样本不可加入叠氮钠、硫柳汞等酶抑制剂，会终止显色反应
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

样本制备：细胞上清、体液样本过滤稀释，去除蛋白沉淀，混匀备用。

酶标板加样：MMP-2 包被板设置复孔，标准品与样本孔单孔加样 100μL，空白孔做阴性对照。

一步添加酶标二抗：所有孔位加入 HRP 标记抗体 50μL，封板密封。

孵育反应：37℃避光孵育 60min。

洗板除杂：洗板 5 次，每次浸泡 28s，拍干孔内残留洗液。

底物显色：加入显色液避光孵育 12min。

终止读数：终止液终止显色，酶标仪检测 OD 值，换算 MMP-2 浓度。