人肌球蛋白轻链(MLC)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法，固相载体包被MLC特异性捕获抗体，待测样本中的肌球蛋白轻链可与固相抗体发生特异性免疫结合，孵育结合后加入酶标记MLC检测抗体，形成稳定的夹心免疫复合物，充分洗涤洗除未结合杂质后，加入底物发生酶促显色反应，有色产物的吸光度值与样本中MLC浓度呈正相关，通过标准曲线拟合计算，可定量检测样本中MLC的含量。
产品参数：

‌灵敏度：≤0.1ng/mL

检测范围：0.25ng/mL~8ng/mL

反应时间：37℃样本孵育 65min；酶结合物 40min；避光显色 10min

保存条件：2~8℃避光保存，严禁冷冻冻裂试剂瓶；失效试剂不可混用

显色系统：TMB 底物显色体系

检测波长：450nm/630nm 双波长

标准曲线绘制：7 点标准品梯度，四参数法绘制曲线，复孔检测取均值计算

注意事项：心肌组织匀浆样本需充分离心去除沉淀；操作佩戴一次性手套防止蛋白污染
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

样本预处理：心肌 / 骨骼肌组织匀浆离心取上清，血清样本避免溶血，按照试剂盒要求比例稀释样本，涡旋振荡 1min 混匀。

微孔板加样排布：MLC 包被酶标板分设空白、标准品、待测样本孔，每孔加入对应液体 100μL，标准品从高浓度到低浓度依次添加。

一步法添加酶标记抗体：直接向所有孔内加入 HRP 标记检测抗体 60μL，封板前轻晃混匀。

避光恒温孵育：37℃封闭孵育 60min，保证抗原与包被抗体、酶标抗体夹心结合。

洗涤去除游离杂质：倾倒孔内液体，洗涤液浸泡洗板 4 次，每次浸泡 25s，吸水纸拍干残留液体。

底物显色培育：每孔分别加入显色 A、B 液各 50μL，避光 37℃显色 14min。

终止检测分析：滴加终止液 50μL，酶标仪 450nm 读取吸光度，计算样本 MLC 浓度。