人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)ELISA试剂盒

本试剂盒基于抗原抗体特异性识别与酶显色放大的间接ELISA原理，酶标板微孔包被人核糖体P蛋白特异性抗原，待测样本中的ARPA/Rib-P抗体可与固相抗原精准结合；洗涤去除游离杂质后，加入辣根过氧化物酶标记二抗孵育结合，再次洗涤去除未结合酶标试剂，加入底物显色，吸光度数值随样本中ARPA抗体含量升高而增大，实现精准定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)ELISA试剂盒

英文名称：ARPA/Rib-P  Elisa Kit
货号：Y-E504

规格：48T/96T

灵敏度：最低可测 0.55AU/mL

检测范围：0.625AU/mL～16AU/mL

反应时间：样本结合 90min；酶标记二抗 45min；显色 11min

保存条件：未拆封 2～8℃；拆分板条密封加干燥剂冷藏

显色系统：双组份 TMB 显色体系

检测波长：450nm

标准曲线绘制：倍比稀释标准品，线性回归绘制标准曲线计算抗体滴度

注意事项：底物液避免接触金属器具，防止提前氧化变色
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

样本稀释：血清 1:92 稀释，混匀后室温静置 6min。

酶标板加样，每孔加液 100μL，区分阴阳性对照与待测样本。

所有孔直接加入酶标记抗原液 100μL，封板摇晃混匀。

37℃避光孵育 62min。

洗涤液洗板 5 次，单次浸泡 35s。

底物显色 16min，全程避光。

终止反应，450nm 测定吸光度，判读结果。
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