人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理测定人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶（CAD）含量，将人CAD特异性单克隆抗体包被于微孔板作为固相载体，加入待测样本与标准品后，样本中的CAD抗原与固相抗体特异性结合，经洗涤去除未结合杂质，加入酶标记二抗形成夹心免疫复合物，底物作用下产生显色反应，终止反应后通过酶标仪检测吸光度，吸光度值与样本中CAD浓度成正比，借助标准曲线即可定量检测样本中目标物质的含量。
产品参数：

‌灵敏度：检测极限 0.1ng/mL

检测范围：0.2ng/mL～75ng/mL

反应时间：封闭后样本孵育 55min，二抗 30min，整体 125min

显色系统：OPD 底物显色体系

检测波长：492nm 主波长

特异性：专一结合 CAD 蛋白，与 ICAD 抑制蛋白无交叉反应

重复性：板内 CV＜7.2%，板间 CV＜10.2%

注意事项：OPD 底物避光配制，现配现用不可隔夜存放
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂盒室温放置 35min，稀释浓缩洗涤液，取出实验所需微孔板条，其余板条密封 2~8℃存放。

梯度稀释 CAD 标准品配制标准曲线梯度液，待测细胞裂解液 / 血清样本离心取上清并稀释。

微孔内分别添加标准品溶液、待测稀释样本、空白稀释液，随即加入酶标工作液，封板密封。

37℃恒温避光孵育 65min，让一抗、样本抗原、酶标二抗完成一步夹心结合。

弃液洗板：每孔加满洗涤液浸泡 45s，倒扣拍干，重复洗涤 5 次，彻底洗去非特异性结合杂质。

加入 TMB 显色液，避光条件下 37℃显色 14min。

加入终止液终止反应，酶标仪 450nm 检测吸光度，依据标准曲线计算样本 CAD 含量。