人谷胱甘肽硫转移酶pi基因(GSTpi)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理定量检测样本中人谷胱甘肽硫转移酶pi蛋白含量。固相载体预先包被GSTpi特异性抗体，待测样本中的GSTpi蛋白与固相抗体特异性结合，洗除未结合的杂蛋白及杂质后，加入酶标记GSTpi配对检测抗体，形成稳定的免疫复合物，经底物酶促显色后，显色强度随样本中GSTpi蛋白浓度升高而增强，通过标准曲线换算可实现精准定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：检测限 0.1ng/mL

检测范围：0.32~20.48ng/mL

反应时间：捕获孵育 82min，二抗结合 52min，显色 13min

显色系统：TMB 显色，1mol/L H₂SO₄终止

检测波长：450nm/630nm

特异性：仅特异性识别 GSTpi 亚型，不识别 GSTα、GSTμ 亚型

重复性：批内 CV＜6.6%，批间 CV＜8.6%

注意事项：核酸蛋白共提取样本需去除 DNA 杂质，防止干扰抗原结合
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂盒全部组分室温平衡 30min，梯度稀释 GSTpi 重组蛋白标准品，划分待测孔、标准孔、空白孔。

微孔内添加 50μL 组织裂解待测上清或梯度标准品，空白孔补加稀释液。

直接加入标记酶抗 GSTpi 单克隆抗体 100μL，封板后 37℃孵育 70min 一步夹心捕获抗原。

洗板 6 次，每次洗涤浸润孔底 30s，彻底拍干板条废液。

加入显色 A、B 液各 50μL，室温避光显色 20min。

加入终止液 50μL 终止显色反应，横向晃动微孔板混匀。

酶标仪 450nm 测吸光度，绘制标准曲线定量样本 GSTpi 表达量。