人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒

本试剂盒基于特异性免疫酶联吸附原理检测样本中人谷胱甘肽含量。试剂盒依托固相包被的GSH特异性抗体，与待测样本中的GSH抗原发生特异性结合，通过洗涤去除样本中无关杂质及游离成分，再加入酶标记配对抗体形成免疫复合物，经酶催化底物显色后，溶液吸光度值与样本中GSH含量呈正相关，结合标准曲线可精准定量检测样本中谷胱甘肽的浓度水平。
产品参数：

‌灵敏度：最小可测 0.04μmol/L

检测范围：0.08~5.12μmol/L

反应时间：样本反应 55min，底物显色 25min

显色系统：改良 TMB 显色体系，避光显色

检测波长：450nm

特异性：特异性结合还原型 GSH，氧化型 GSSG 交叉反应＜5%

重复性：板内 CV≤5.0%，板间 CV≤7.0%

注意事项：样本提取后立即检测，GSH 极易氧化失活，全程避光低温操作
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂盒试剂室温平衡 38min，梯度稀释 GSH 标准品，准备组织匀浆待测孔、标准孔、空白孔。

每孔加入 50μL 标准品或上清待测样本，空白孔加入样本稀释液补齐体积。

一步添加酶标记抗 GSH 抗体 100μL，封板后 37℃孵育 72min 完成免疫结合。

洗板 5 次，每次洗涤液浸润孔壁 42s，吸水纸拍干板条残留液体。

加入 TMB 显色液 100μL，37℃避光显色 14min。

加入终止液 50μL 终止反应，缓慢震荡微孔板混匀。

450nm 测定 OD 吸光值，根据标准曲线计算样本 GSH 含量。