人谷氨酸脱羧酶(GAD)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理检测样本中人谷氨酸脱羧酶含量。固相微孔板固定GAD特异性捕获抗体，加入待测样本后，样本中的GAD蛋白与固相抗体特异性结合，洗涤去除非特异性结合杂质，再加入酶标记的GAD检测抗体，构建夹心式免疫复合物，后续通过底物酶促显色反应产生显色信号，显色深浅与样本中GAD含量呈正相关，通过吸光度检测与标准曲线比对，实现GAD蛋白的精准定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：检出限 0.09ng/mL

检测范围：0.3~19.2ng/mL

反应时间：固相捕获 65min，酶标二抗 50min，显色 14min

显色系统：稳定型 TMB 单组份显色液

检测波长：450nm+630nm

特异性：区分 GAD65 与 GAD67 亚型，无谷氨酸合成酶交叉反应

重复性：同板 CV＜5.9%，批次 CV＜7.9%

注意事项：脑组织样本需低温运输，防止酶蛋白失活
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂盒室温静置 30min，配制 GAD 梯度标准品，区分待测血清孔、标准孔、空白对照孔。

每孔添加 50μL 待测稀释样本或梯度标准溶液，空白孔加入稀释缓冲液。

一步加入 HRP 标记抗 GAD 抗体 100μL，封板密封，37℃孵育 52min。

弃去孔内液体，洗板 4 次，每次浸泡 55s，拍干微孔残留洗涤液。

加入显色 A、B 液各 50μL，37℃避光显色 15min。

加入终止液 50μL 终止显色反应，轻摇板条混匀液体。

450nm 检测 OD 值，绘制标准曲线计算样本 GAD 蛋白浓度。