人抗Q热抗体(anti-Q-Ab)ELISA试剂盒

本试剂盒基于间接酶联免疫吸附原理，酶标板微孔包被Q热特异性抗原，待测样本中的抗Q热抗体可与固相抗原特异性结合，洗涤去除未结合杂质后，加入酶标记抗人二抗进行特异性结合反应，孵育完成后加入显色底物产生有色反应产物，终止显色后检测吸光度，根据标准曲线计算样本中抗Q热抗体的浓度。
基本参数‌：

产品名称：人抗Q热抗体(anti-Q-Ab)ELISA试剂盒

英文名称：anti-Q-Ab Elisa Kit
货号：Y-E448

规格：48T/96T

灵敏度：最低滴度 1:16

检测范围：定性阴阳性，定量 0.5–22AU/mL

反应时间：样本孵育 100min，酶结合物 65min，显色 19min，总 184min

保存条件：整套试剂 2～8℃避光，浓缩洗涤液室温可存 6 个月

显色系统：单组份 TMB 显色

检测波长：450nm

标准曲线绘制：阳性血清梯度稀释制作标准曲线，判读抗体滴度

注意事项：野外接触牲畜人群样本易阳性；加样防止气泡产生影响读数
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

样本采集处理

外周血分离血清，无微生物污染，样本 4℃可保存 48h，长期低温分装冻存。

试剂盒试剂平衡

全套试剂室温静置 27min，稀释浓缩洗涤液配制成 1× 工作液。

标准品梯度加孔

Q 热抗体标准品溶解倍比稀释 6 梯度，每孔添加 50μL 标准品稀释液。

样本共孵育步骤

待测样本 50μL 入孔，加入酶标记 Q 热抗原液 50μL，封板 37℃孵育 52min。

微孔洗涤操作

倒掉孔内液体，洗涤液浸泡 35s 拍干，循环洗板 4 次，避免孔间液体飞溅。

避光显色孵育

每孔加入显色底物 100μL，遮光 37℃显色 13min。

终止结果判读

终止液终止显色，450nm 读取 OD 值，对照临界值判定抗体阴阳性。
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