人抗BP180抗体(BP180-Ab)ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接酶联免疫吸附试验原理，酶标板固相包被纯化的BP180抗原，待测样本中的抗BP180抗体与微孔内固相抗原特异性结合，洗涤去除未结合组分后，加入辣根过氧化物酶标记的抗人抗体，与样本特异性抗体结合，孵育后加入显色底物发生显色反应，终止反应后测定吸光度，通过标准曲线换算得到样本中抗BP180抗体的含量。
基本参数‌：

产品名称：人抗BP180抗体(BP180-Ab)ELISA试剂盒

英文名称：BP180-Ab  Elisa Kit
货号：Y-E457

规格：48T/96T

灵敏度：0.1IU/mL

检测范围：0.2–20IU/mL

反应时间：室温孵育 90min，洗板后二抗 60min，避光显色 14min，终止读数

保存条件：2～8℃，底物液严禁光照，不可冻存

显色系统：单组分稳定型 TMB 显色液

检测波长：450nm，参比 630nm

标准曲线绘制：6 点标准品，四参数拟合曲线计算抗体 IU 浓度

注意事项：皮肌炎、其他自身免疫病血清易出现交叉反应，需结合临床；洗板液注满孔底，浸泡 30s 再拍干
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：

样本处理规范

血清样本采集后室温凝固离心取上清，4℃短期保存≤24h，长期 - 20℃分装保存，检测前室温融化混匀。

试剂稀释平衡

所有试剂室温平衡 26min，25 倍浓缩洗涤液用蒸馏水稀释为使用液，现配现用。

标准品加孔稀释

BP180 抗体标准品复溶后梯度稀释，依次添加 50μL 至标准品系列孔，设置阴阳对照孔。

样本与标记物共孵育

待测样本每孔 50μL，加入 HRP 标记 BP180 抗原溶液 50μL，封板膜密封，37℃孵育 50min。

洗板去除未结合组分

倾倒废液，加满洗涤液浸泡 35s，倒扣拍干，重复洗板 6 次，杜绝孔间污染。

避光显色反应

每孔添加显色液 A、B 混合液 100μL，遮光 37℃反应 17min，不得随意延长时间。

终止定量检测

终止液终止显色，450nm 波长测 OD 值，根据标准曲线换算样本抗 BP180 抗体浓度。
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