人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，将人巨噬细胞趋化因子特异性抗体固定于微孔板作为固相载体，待测样本中的MCF与固相抗体特异性结合；孵育纯化后加入酶标记MCF检测抗体，形成稳定的免疫复合物；经底物显色、终止反应后检测各孔吸光度，吸光度数值随样本中巨噬细胞趋化因子含量升高而增大，对照标准曲线可精准定量检测靶标因子含量。
基本参数‌：

产品名称：人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒

英文名称：MCF   Elisa Kit
货号：Y-E037

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测 5.7pg/mL

检测范围：11.4~730pg/mL

反应时间：样本孵育 62min，酶结合物 31min，显色 10min

保存条件：试剂盒 2~8℃避光，板条独立分装按需取用

显色系统：即用型单液显色体系

检测波长：450nm 单波长测定

标准曲线绘制：半对数线性拟合标准曲线，浓度对数与 OD 值构建方程

注意事项：样本避免高温环境放置；加样无气泡；显色时间严格按照说明书执行
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

整套试剂室温平衡 30min，取出酶标板条，设置标准孔、样本孔、空白对照孔，每孔上样稀释样本 100μL，空白孔填充稀释缓冲液。

直接加入酶结合物工作液 50μL，混匀后封板封口。

37℃孵育 65min，酶标板单层平放孵育。

揭膜倒掉孔内液体，洗板液浸泡 30s 后甩干，连续洗板 5 次，吸水纸彻底吸干残液。

每孔依次加显色 A、B 液各 50μL，避光显色 16min。

加入终止液 50μL 混匀终止酶促显色。

酶标仪 450nm 读取 OD 值，定量样本 MCF 趋化因子浓度。
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