人雌激素(E)ELISA试剂盒

本试剂盒基于竞争法ELISA检测原理，针对小分子雌激素进行定量检测，微孔板预先包被雌激素特异性抗原，待测样本中的雌激素与固相抗原竞争性结合有限的酶标特异性抗体，孵育平衡后洗涤去除未结合反应物，加入底物显色，酶催化底物产生有色产物，显色深浅与样本中雌激素浓度呈负相关，依据吸光度值和标准曲线可精准测定靶标含量。
产品参数：

‌灵敏度：0.06pg/mL

检测范围：0.2pg/mL–12.8pg/mL

反应时间：155min，竞争结合 85min，酶物 50min，显色 20min

显色系统：单组份 TMB 显色液

检测波长：450nm+620nm

特异性：广谱总雌激素检测，孕激素、雄激素干扰可忽略

重复性：板内 CV＜6.1%，板间 CV＜8.0%

注意事项：女性采血避开生理期剧烈波动期；样本密封避光保存。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 30min，配制总雌激素 E 梯度标准品，酶标板做好孔位分类标记。

精准加样标准品溶液、体液待测样本、空白稀释缓冲液至对应微孔。

直接加入酶标记抗原工作液覆膜密封，37℃恒温孵育 65min 一步竞争 ELISA。

去除封板倾倒废液，洗板 5 次，浸泡 30s / 次，洗涤去除游离结合物。

显色液避光室温显色 16min。

终止液终止酶促显色，轻摇酶板混匀。

450nm 检测吸光度，定量样本总雌激素浓度，留存原始检测数值。