人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测技术，微孔板预先包被人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)特异性抗体，待测样本中的SLPI抗原与固相抗体特异性结合，后续结合酶标检测抗体形成完整夹心免疫复合物，经洗涤、显色、终止步骤后，通过吸光度检测定量测定样本中人SLPI的表达含量。
基本参数‌：

产品名称：人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA试剂盒

英文名称：SLPI ELISA Kit
货号：Y-E2670

规格：48T/96T

灵敏度：最低可测 0.04ng/mL

检测范围：0.1ng/mL - 16ng/mL

反应时间：样本孵育 80min，二抗 42min，避光显色 18min

显色系统：A+B 双组份 TMB 混合使用

检测波长：450nm

特异性：靶向 SLPI 活性结构域，与 α1 - 抗胰蛋白酶交叉反应＜2.1%

重复性：批内 CV≤5.3%，批间 CV≤7.6%

注意事项：痰液样本需经液化处理后再离心取上清上样检测。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

所有试剂室温回温 30min，纯水稀释浓缩洗涤液，梯度稀释 SLPI 标准品，在酶标板标注各组孔位。

各孔添加待测样本、标准品、空白稀释液 50μL，同步加入一步法酶联复合物 100μL，封板严密密封。

37℃恒温避光孵育 53min，温度稳定无偏差。

撕开封板倾倒废液，洗涤液浸泡每孔 35s，倒扣拍干，洗板 5 次。

每孔加入显色 A、B 液各 50μL，轻微震荡后避光显色 18min。

每孔加入终止液 50μL，摇晃酶标板终止显色反应。

15min 内 450nm 读取数值，依据标准曲线计算 SLPI 抑制因子浓度。
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