人非神经元性烯醇化酶(NNE)ELISA试剂盒

本试剂盒基于经典双抗体夹心ELISA技术，固相微孔板包被人非神经元性烯醇化酶(NNE)特异性抗体，孵育后样本中的NNE抗原与固相抗体特异性结合，结合酶标检测抗体形成免疫复合物，经洗涤纯化后进行酶促显色反应，依据吸光度数值可定量测定样本中人NNE的含量。
基本参数‌：

产品名称：人非神经元性烯醇化酶(NNE)ELISA试剂盒

英文名称：NNE Elisa Kit
货号：Y-E989

规格：48T/96T

灵敏度：检出下限 0.14ng/mL

检测范围：0.6ng/mL - 50ng/mL

反应时间：抗原孵育 72min，二抗 41min，显色 18min

显色系统：TMB 单组份显色液，盐酸终止

检测波长：450nm+600nm

特异性：区分 NNE 与神经元特异性烯醇化酶 NSE，交叉率＜2.7%

重复性：板内 CV≤6.4%，板间 CV≤8.3%

注意事项：溶血样本不可使用，红细胞内烯醇化酶会严重干扰检测结果
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：

试剂盒试剂室温平衡 27min，配比稀释洗涤液，用稀释液配制 NNE 梯度标准溶液，排布 96 孔板检测点位。

各孔添加检测样本、标准品、空白稀释液 50μL，马上加入一步法酶标记抗体液 100μL，封板密封。

37℃避光孵育 64min，不可中途开启封板。

弃除废液，洗涤液加满每孔浸泡 26s，拍干，洗板 4 次。

加入显色 A、B 液各 50μL，轻微震荡后 37℃避光显色 17min。

加入终止液 50μL 终止显色反应，混匀液体。

酶标仪 450nm 读取吸光度，绘制标准曲线定量 NNE 浓度。
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