人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争法ELISA检测原理，适配非甲基化寡核苷酸(NON)小分子检测特性，固相微孔板包被对应特异性抗原，样本中的人NON与固相抗原竞争结合限量酶标特异性抗体，样本NON含量越高，固相结合的酶活性越低，底物显色越浅，通过吸光度值反向定量检测样本中人NON的浓度。
基本参数‌：

产品名称：人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA试剂盒

英文名称：NON ELISA Kit
货号：Y-E2621

规格：48T/96T

灵敏度：最低可检出 0.8pg/μL

检测范围：2pg/μL - 120pg/μL

反应时间：核酸结合孵育 110min，酶标记探针 60min，显色 28min

显色系统：改良 TMB 显色体系

检测波长：450nm

特异性：仅结合未甲基化 CpG 寡核苷酸，高度甲基化序列交叉反应＜1.5%

重复性：批内 CV≤7.8%，批间 CV≤10.5%

注意事项：实验耗材无 DNase/RNase 污染；开盖操作避免气溶胶核酸污染样本
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

所有组分室温回温 31min，稀释浓缩洗涤液，逐级稀释 NON 标准品，标记酶标板分组孔位。

空白孔加稀释液，其余孔加入标准品或待测样本 50μL，随即加入一步法酶工作液 100μL，封板。

37℃避光孵育 52min，孵育箱温度恒定 37℃。

去除封板倒掉废液，洗涤液浸泡孔位 33s，拍干，连续洗板 6 次。

每孔加入显色底物混合液 100μL，避光 37℃显色 19min。

滴加终止液 50μL 每孔，充分混匀终止反应。

10min 内 450nm 检测 OD 值，计算 NON 寡核苷酸相对含量。
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