人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒

本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA原理，固相微孔板包被人泛素分解酶(DUB)特异性抗体，孵育后样本中的DUB抗原与固相抗体特异性结合，随后结合酶标记检测抗体形成完整免疫复合物，去除未结合物质后通过酶促底物显色，吸光度与样本DUB浓度呈正相关，可实现人DUB的精准定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒

英文名称：DUB Elisa Kit
货号：Y-E3062

规格：48T/96T

灵敏度：检出下限 0.11U/mg

检测范围：0.4U/mg - 36U/mg

反应时间：抗原孵育 70min，酶标记物 38min，显色 17min

显色系统：TMB 单液显色体系

检测波长：450nm

特异性：广谱识别人源多数 DUB 家族核心结构域，与 E1/E2/E3 无交叉

重复性：批内 CV≤7.3%，批间 CV≤9.2%

注意事项：裂解样本全程添加蛋白酶抑制剂；显色环境温度控制在 22-25℃
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

所有试剂常温静置 30min，配比稀释浓缩洗涤液，用稀释液配制 DUB 梯度标准溶液，规划 96 孔板排布。

各孔加入待测体系液体 50μL，随即加入一步法酶联反应液 100μL，封板膜严密封闭板口。

37℃隔水孵育避光 50min，孵育全程酶标板平放。

去除封板倒掉废液，洗涤液灌满孔位浸泡 40s，拍干，洗板 6 次。

每孔添加显色 A、B 液各 50μL，轻微震荡后 37℃避光显色 11min。

加入终止液 50μL 终止反应，混匀孔内液体。

450nm 检测 OD 值，拟合标准曲线定量 DUB 酶活性对应浓度。
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