人泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理，固相载体微孔板包被人泛素蛋白(Ub)特异性捕获抗体，样本中的Ub抗原与固相抗体特异性结合后，匹配的酶标检测抗体与之结合形成免疫复合物，洗涤去除游离杂质后，酶催化底物产生显色反应，显色深浅对应样本中Ub的含量，通过吸光度检测可精准定量人泛素蛋白水平。
基本参数‌：

产品名称：人泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒

英文名称：Ub ELISA Kit
货号：Y-E2998

规格：48T/96T

灵敏度：检出限 0.07ng/mL

检测范围：0.2ng/mL - 18ng/mL

反应时间：一抗 60min，二抗 35min，显色 14min

显色系统：即用型 TMB 显色液，终止液为 2mol/L 硫酸

检测波长：450nm

特异性：特异性结合单体泛素，多聚泛素链弱结合，交叉率＜2.5%

重复性：批内 CV≤5.5%，批间 CV≤7.8%

注意事项：样本避免蛋白酶污染，防止泛素被降解；洗板务必彻底，降低背景值
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

试剂室温回温 32min，纯水稀释浓缩洗涤液，使用样本稀释液配制 Ub 系列标准品，排布酶标板检测孔。

各孔分别加入标准品、待测样本、空白稀释液 50μL，马上加入酶标记免疫工作液 100μL，封板密封。

37℃避光恒温孵育 75min，不得中途打开封板查看。

去除封板倾倒废液，洗涤液浸泡每孔 35s，拍净残液，循环洗板 4 次。

每孔分加显色 A、B 液各 50μL，避光 37℃显色 17min。

滴加终止液 50μL 每孔，摇匀终止显色。

450nm 波长测吸光度，绘制标准曲线，换算样本 Ub 检测浓度。
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