人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板包被人UGT2B4特异性捕获抗体，可特异性识别样本中的UGT2B4蛋白抗原，加入待测样本与系列标准品完成抗原抗体结合后，洗板清除游离杂质，加入酶标记特异性检测抗体构建免疫夹心复合物，经底物显色、终止反应、吸光度检测后，对照标准曲线精准定量样本中人UGT2B4的蛋白含量。
基本参数‌：

产品名称：人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA试剂盒

英文名称：UGT2B4 ELISA Kit
货号：Y-E2606

规格：48T/96T

灵敏度：最低检出 0.08ng/mL

检测范围：0.25ng/mL～16ng/mL

反应时间：37℃样本 84min，酶复合物 45min，显色 18min

显色系统：单组分稳定显色底物，2～8℃避光

检测波长：450nm 为主检测波长，570nm 校正背景

特异性：严格靶向 UGT2B4，UGT2 家族其他亚型交叉反应＜5%

重复性：板内 CV＜5.9%，板间 CV＜9.9%

注意事项：肝组织裂解样本需添加蛋白酶抑制剂，防止 UGT 酶蛋白降解
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 30min，稀释浓缩洗涤液，拆分酶标板，预留微孔板条密封置于 2~8℃环境避光保存。

孔位分组上样，梯度标准品、细胞待测样本每孔添加 50μL，空白孔不添加试剂。

直接向各加样孔加入一步法酶标记工作液 100μL，震荡混匀后覆膜封板。

37℃恒温孵育 70min，全程保持酶标板水平放置。

撕去封板膜，倾倒孔内废液，洗涤液注满每孔浸泡 35s 后彻底拍干，重复洗板 5 次。

在避光环境下依次加入显色剂 A 液、B 液各 50μL，轻微摇匀，37℃避光显色 16min。

快速加入终止液 50μL 终止酶促显色反应，混匀后 8min 内使用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度，拟合标准曲线计算样本 UGT2B4 含量。
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