人胞浆免疫球蛋白(CIg)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，酶标板微孔预先包被抗人CIg特异性捕获抗体，待测样本与标准品中的胞浆免疫球蛋白抗原可特异性结合至固相抗体上，洗板去除游离杂蛋白与非特异性结合杂质后，加入HRP标记的CIg检测抗体，形成稳定的夹心式免疫复合物；经底物催化显色、终止反应后，酶标仪检测特定波长吸光度，依据吸光度与CIg浓度的线性正相关关系，结合标准曲线精准定量样本中胞浆免疫球蛋白的含量。
产品参数：

‌灵敏度：检出下限 0.4 μg/mL

检测范围：0.8 μg/mL ~ 50 μg/mL

反应时间：细胞裂解上清孵育 130min，二抗 75min，显色 19min

显色系统：双组份 TMB 显色液

检测波长：450nm

特异性：识别胞浆内 Ig 总免疫球蛋白，不结合膜表面免疫分子

重复性：批内 CV＜8%，批间 CV＜10.2%

注意事项：裂解过程轻柔，防止蛋白过度变性；空白裂解液做本底扣除
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

微孔板室温放置 30min，标准品梯度稀释，细胞裂解上清样本按比例稀释处理。

各孔上样 100μL 标准品或样本，空白孔补稀释液，加入标记抗体工作液 55μL 覆膜封板。

37℃湿盒孵育 87min。

洗板 6 次，每次浸泡 25s，倒扣酶标板拍干所有废液。

加入显色工作液 100μL，遮光显色 14min。

终止液 50μL 快速终止酶促显色。

450nm 波长测定吸光度，绘制标准曲线定量胞浆免疫球蛋白含量。