人伴侣蛋白10(CPN10)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术原理，酶标板微孔预先固定抗人CPN10特异性捕获抗体，加入待测样本与梯度标准品后，体系中的伴侣蛋白10抗原与固相抗体特异性结合，洗板清除非特异性结合物质后，加入辣根过氧化物酶标记的CPN10检测抗体，构建完整的抗体-抗原-酶标抗体复合物；后续经底物显色、终止反应，通过酶标仪检测吸光度，根据吸光度与CPN10浓度的正比关系，结合标准曲线精准测定样本中CPN10的表达含量。
产品参数：

‌灵敏度：最小检出 0.25 ng/mL

检测范围：0.5 ng/mL ~ 32 ng/mL

反应时间：37℃孵育 110min，酶结合物 60min，显色 14min

显色系统：稳定型即用 TMB 显色液

检测波长：450nm+600nm

特异性：特异性结合线粒体 CPN10，与 CPN60 无交叉反应

重复性：批内 CV＜7.4%，批间 CV＜9.6%

注意事项：细胞样本冰上裂解；分装冻存避免多次冻融损伤靶蛋白
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂与酶标板室温平衡 25min，配制系列浓度标准品，胞内蛋白提取液稀释备用。

各孔加入 100μL 标准品或待测样本，空白孔稀释液补齐，加入生物素标记抗体 50μL 密封。

室温孵育 84min，全程避免强光直射。

洗涤液洗板 4 次，浸泡 38s / 次，彻底洗去游离杂蛋白。

加入 HRP 亲和素工作液 100μL，孵育 32min。

显色液避光反应 18min。

终止反应后 450nm 检测 OD 值，计算伴侣蛋白 10 表达量。