人白细胞弹性蛋白酶(HLE)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，酶标板微孔预先包被抗人HLE特异性捕获抗体，待测样本与标准品中的白细胞弹性蛋白酶抗原可特异性结合至固相抗体上，洗板清除非特异性结合杂质后，加入辣根过氧化物酶标记的HLE检测抗体，形成稳定的夹心式免疫复合物；后续经底物显色、终止反应，通过酶标仪测定吸光度，依据吸光度与HLE浓度的线性正相关关系，结合标准曲线精准定量样本中HLE的含量。
产品参数：

‌灵敏度：检出下限 0.3 ng/mL

检测范围：0.6 ng/mL ~ 38 ng/mL

反应时间：37℃样本孵育 95min，酶标抗体 50min，显色 13min

显色系统：双组分混合显色液

检测波长：450nm

特异性：特异性结合人中性粒细胞弹性蛋白酶，不识别胰蛋白酶、糜蛋白酶

重复性：批内 CV≤7%，批间 CV≤9.8%

注意事项：溶血样本会释放胞内酶，造成结果假性升高；样本避免反复冻融 3 次以上
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

微孔板室温放置 33min，稀释标准品制备浓度梯度，血清样本无需预稀释直接上样。

各孔加样 100μL，空白孔稀释液补齐，加入生物素化检测抗体 55μL 覆膜。

室温避光孵育 86min。

洗板 5 次，每次浸泡 35s，拍干孔内残留洗涤液。

加入 HRP 亲和素工作液 100μL，孵育 31min。

显色液混合添加后避光反应 13min。

终止后 450nm 测值，计算样本 HLE 蛋白酶浓度。