人刀豆素A(ConA)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理，微孔板固相载体包被人刀豆素A特异性抗体，加入待测样本与标准品后，样本中的ConA抗原与固相抗体特异性结合，洗除未结合杂质，加入酶标检测抗体形成夹心免疫复合物，经底物显色反应后，显色强度与样本中ConA含量成正比，通过吸光度检测与标准曲线比对，完成样本中目标物质的定量测定。
基本参数‌：

产品名称：人刀豆素A(ConA)ELISA试剂盒

英文名称：ConA  Elisa Kit
货号：Y-E795

规格：48T/96T

灵敏度：≤0.3μg/mL

检测范围：0.625μg/mL - 40μg/mL

反应时间：总时长 102min（样本 52min，二抗 30min，显色 20min）

显色系统：TMB 双液混合显色

检测波长：450nm，参比 630nm

特异性：特异性定量外源 ConA 残留，与人内源凝集素无交叉

重复性：板内 CV＜7.3%，板间 CV＜9.1%

注意事项：该试剂盒用于外源残留检测，不可用于人体内源蛋白检测
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

整套试剂室温回温 27min，稀释浓缩洗涤液，配制 ConA 梯度标准液，酶标板分区标记孔位。

各孔依次加入标准品、预处理待测样本、空白稀释液，加入一步法酶结合液，封板密封。

37℃避光孵育 54min，实现抗原抗体特异性结合。

弃除孔内反应液，洗涤液浸泡 25s，洗板 4 次，倒扣拍干板条。

加入显色底物，混匀后 37℃避光显色 11min。

加入终止液终止显色反应，充分摇匀。

450nm 酶标仪测定 OD 值，换算 ConA 样本浓度。
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