人蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理，将人蛋白激酶C特异性捕获抗体包被于微孔板固相载体，加入待测样本后，样本内的PKC抗原与固相抗体特异性结合，经洗板去除未结合物质，加入对应的酶标检测抗体形成夹心免疫结构，随后启动底物显色反应，酶催化底物显色的强度与样本中PKC浓度成正比，结合标准曲线即可完成样本中目标蛋白的定量分析。
基本参数‌：

产品名称：人蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒

英文名称：PKC Elisa Kit
货号：Y-E3023

规格：48T/96T

灵敏度：≤0.11ng/mL

检测范围：0.23ng/mL - 15ng/mL

反应时间：总时长 100min（样本 50min，二抗 30min，显色 20min）

显色系统：双组分 TMB A 液 + B 液混合显色

检测波长：450nm 单波长检测

特异性：广谱识别人源 PKA 家族总蛋白，不结合丝氨酸其他激酶

重复性：板内 CV＜6.4%，板间 CV＜8.1%

注意事项：洗板步骤务必充分，残留洗液会大幅降低检测准确度
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

试剂盒常温放置 28min，稀释浓缩洗液，配制 PKC 梯度标准溶液，标记酶标板不同功能孔。

依次添加标准品、稀释待测样本、空白缓冲液，每孔加入酶标记抗体工作液，密封酶标板。

37℃避光孵育 58min，一步法完成抗原抗体结合。

弃除孔内反应液，洗涤液浸泡 30s，洗板 4 次，吸水纸拍干板条。

加入 TMB 显色液，震荡混匀，37℃避光显色 15min。

加入终止液终止酶促显色，混匀体系。

450nm 波长检测 OD 值，依据标准曲线定量 PKC 含量。
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