人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术原理，微孔板固相表面包被有人弹性蛋白酶特异性捕获抗体，检测时加入待测样本与梯度标准品，样本中的人弹性蛋白酶抗原可与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，形成稳定的夹心免疫复合物，经充分洗涤去除未结合酶标抗体后，加入显色底物发生催化显色反应，反应终止后检测吸光度，其数值与样本中人弹性蛋白酶的浓度成正比，可精准定量样本中目标蛋白含量。
基本参数‌：

产品名称：人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒

英文名称：Elastase  Elisa Kit
货号：Y-E970

规格：48T/96T

灵敏度：≤0.08U/L

检测范围：0.156U/L - 10U/L

反应时间：总时长 130min（一抗结合 70min，酶标二抗 40min，终止前显色 20min）

显色系统：TMB 双组份 A/B 显色液

检测波长：450nm 单波长读数

特异性：识别活化型 Elastase，不结合酶原前体

重复性：板内 CV＜5.8%，板间 CV＜7.5%

注意事项：底物液严禁接触皮肤黏膜，加样顺序不可颠倒
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 25min，按说明书稀释浓缩洗涤液，梯度稀释 Elastase 标准品，酶标板分设空白、标品、样品孔并编号区分。

标品孔加系列浓度标准品，样品孔加入稀释处理后的待测血清 / 组织上清样本，空白孔补稀释液，每孔添加酶标记一抗工作液，覆膜封板。

37℃水浴环境避光孵育 45min，完成固相载体上抗原抗体一步结合反应。

揭去封板膜，倾倒孔内液体，洗板液注满每孔浸泡 25s 后拍净，循环洗板 4 次，去除未结合游离组分。

各孔同步加入 TMB 显色混合底物，轻微振荡混匀，37℃避光条件下显色 12min。

精准加入终止液终止酶促显色，水平轻摇酶标板 10s 保证体系混匀。

酶标仪设定 450nm 检测波长，测定每孔吸光度，拟合标准曲线换算样本弹性蛋白酶浓度。
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